期刊简介
1978年创刊，中华人民共和国卫生部主管，中华医学会、哈尔滨医科大学主办。本刊原名《国外医学》免疫学分册，公开发行的国家级学术期刊。期刊适合于从事免疫学以及相关学科、交叉学科的科研、教学和广大的临床医务工作者参考和交流。
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首页>国际免疫学杂志
- 杂志名称：国际免疫学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会 哈尔滨医科大学
- 国际刊号：1673-4394
- 国内刊号：23-1535/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：期刊收录：上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中)
鼠抗重组人跨膜四蛋白33抗体的制备及其研究
朱李茹；唐晓磊；王雯；刘胜武
关键词：跨膜四蛋白33, 亲和纯化, 抗体, 流式细胞术
摘要：目的 制备鼠抗重组跨膜四蛋白33(TSPAN33)抗体并验证TSPAN33在桥本氏甲状腺炎外周血B细胞中的表达.方法 通过PCR法从霍奇金淋巴瘤细胞的eDNA中扩增TSPAN33基因,并构建到pET32a表达载体中.使用IPTG诱导重组蛋白的表达,通过镍柱亲和层析纯化获得TSPAN33蛋白.以纯化的TSPAN33蛋白混合福氏完全佐剂免疫Balb/c小鼠制备抗体,通过合成TSPAN33胞外区肽段耦联环氧基磁珠,亲和富集抗TSPAN33胞外区特异性IgG,洗脱得抗体用酶联免疫吸附实验(ELISA)和Western blot分别检测效价和特异性.同时使用制备的抗体初步对桥本氏甲状腺炎(HT)患者外周血TSPAN33+B细胞比例进行检测.结果 成功的表达、纯化了TSPAN33重组蛋白,抗TSPAN33蛋白免疫后血清通过固相肽段亲和富集纯化后抗体效价为1∶64 000,Western blot和流式细胞术分析显示该纯化抗体不但能够与TSPAN33蛋白特异性的结合,同时还能够和天然的TSPAN33结合,流式细胞术结果显示HT患者外周血TSPAN33+B细胞比例为(4.71±0.43)％,高于健康组(1.95±0.36)％(P＜0.01).结论 以重组TSPAN33为免疫原,成功地制备高效价、高特异性的兔抗TSPAN33抗体,为进一步进行TSPAN33的检测及其临床应用研究奠定了基础.
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