期刊简介

       1978年创刊,中华人民共和国卫生部主管,中华医学会、哈尔滨医科大学主办。本刊原名《国外医学》免疫学分册,公开发行的国家级学术期刊。期刊适合于从事免疫学以及相关学科、交叉学科的科研、教学和广大的临床医务工作者参考和交流。                

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  • 杂志名称:国际免疫学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部和计划生育委员会
  • 主办单位:中华医学会 哈尔滨医科大学
  • 国际刊号:1673-4394
  • 国内刊号:23-1535/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:期刊收录:上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中)
国际免疫学杂志2016年第02期

人类免疫缺陷病毒-1包膜糖蛋白gp41的表达及优化

包丽娜;白杨;姚岚;庄敏;凌虹

关键词:人类免疫缺陷病毒-1, gp41, 原核表达, 优化
摘要:目的 优化HIV-1本地流行株06044 gp41蛋白表达设计,为gp41免疫原的制备提供实验基础.方法 以含HIV-1 06044 gp41基因的质粒为模板,采用聚合酶链反应(PCR)扩增gp41目的基因,分别构建原核表达载体pET26b-gp41T(含546~683 aa片段)及去掉N-端(NHR)和C-端(CHR)七价重复序列中间部分loop区(582~627aa)的pET26b-gp41 T(△L),经测序确认后,转化至大肠杆菌感受态细胞BL21 (DE3)中,IPTG诱导表达.用聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot检测并鉴定重组表达蛋白.优化了重组蛋白的诱导表达条件.结果 pET26b-gp41T和pET26b-gp4 1T (△L)重组表达质粒均能表达gp41蛋白,gp41T (△L)蛋白表达量高于gp41T;不同IPTG浓度诱导的蛋白表达量没有区别;用1 mmol/L IPTG诱导后,37℃条件下表达量高.Western blot结果显示,gp41T (△L)与His抗体结合性能好.结论 实验获得了稳定表达HIV-1 06044 gp41的原核表达载体以及表达条件,为大量制备gp41蛋白免疫原奠定了基础.