期刊简介

       1978年创刊,中华人民共和国卫生部主管,中华医学会、哈尔滨医科大学主办。本刊原名《国外医学》免疫学分册,公开发行的国家级学术期刊。期刊适合于从事免疫学以及相关学科、交叉学科的科研、教学和广大的临床医务工作者参考和交流。                

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  • 杂志名称:国际免疫学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部和计划生育委员会
  • 主办单位:中华医学会 哈尔滨医科大学
  • 国际刊号:1673-4394
  • 国内刊号:23-1535/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:期刊收录:上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中)
国际免疫学杂志2015年第03期

结核分枝杆菌Rv0073基因在大肠杆菌中的表达及纯化

孙高翔;潘新灵;崔佳奕;凌虹;李迪

关键词:结核分枝杆菌, Rv0073, 表达, 纯化
摘要:目的 构建结核分枝杆菌(MTB) Rv0073基因原核表达载体并进行表达和纯化.方法 以MTB H37Rv基因组DNA为模板,采用聚合酶链反应(PCR)扩增目的基因片段,构建原核表达载体pET26b-Rv0073,经测序确定无误后转化至大肠杆菌(E.coli)感受态细胞BL21中.用聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)方法检测重组蛋白表达,检测异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导不同时间、不同温度条件下重组蛋白表达量.采用His镍磁珠进行外源蛋白小量纯化.结果 成功构建重组表达质粒,重组蛋白经IPTG诱导后,2h开始明显表达且表达量无时间依赖性,在不同温度诱导下,重组蛋白的表达量随温度的增高而减少.重组蛋白以包涵体形式存在,经His镍磁珠纯化后获得重组蛋白.结论 成功构建并表达Rv0073蛋白,为后续Rv0073的大量纯化及其功能研究奠定了基础.