期刊简介

       1978年创刊,中华人民共和国卫生部主管,中华医学会、哈尔滨医科大学主办。本刊原名《国外医学》免疫学分册,公开发行的国家级学术期刊。期刊适合于从事免疫学以及相关学科、交叉学科的科研、教学和广大的临床医务工作者参考和交流。                

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  • 杂志名称:国际免疫学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部和计划生育委员会
  • 主办单位:中华医学会 哈尔滨医科大学
  • 国际刊号:1673-4394
  • 国内刊号:23-1535/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:期刊收录:上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中)
国际免疫学杂志2015年第05期

全人源抗人肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体单克隆抗体蛋白高效表达体系的建立及其功能性分析

石佳宁;韩晓健;吕福莲;毕冬梅;金艾顺

关键词:肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体, 肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体, 单克隆抗体, 凋亡
摘要:目的 建立高效表达全人源抗人肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体(TRAIL)-R1单克隆抗体(TR1-404)蛋白体系,并评价TR 1-404抗体蛋白功能特性.方法 构建pcDNA3.4载体抗体质粒,转染Expi293 FTM细胞,表达抗体蛋白.收集细胞培养上清,使用ProteinA/G纯化抗体蛋白.利用双抗体夹心和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体蛋白浓度及特异性.流式细胞分析检测TR1-404与Hela细胞和HCT116细胞表面TRAIL-R1的结合能力.MTT法检测在不同时间点TR1-404、TRAIL及二者联合作用对Hela细胞和HCT116细胞生存和增殖的影响.Annexin V/PI双染色检测Hela细胞和HCT116细胞凋亡.结果 成功构建pcDNA3.4载体抗体质粒和建立Expi293 FTM细胞蛋白高效表达系统.精制的TR1-404抗体既与重组TRAIL-R1抗原特异性结合,也能与Hela和HCT116细胞表面的TRAIL-R1结合.发现TR1-404联合TRAIL作用于Hela细胞,肿瘤细胞凋亡效果显著提高.而在HCT116细胞中,TRAIL与TR1-404的联合作用未见显著提高.结论 成功建立抗体蛋白高效表达系统.TR1-404抗体特异性与TRAIL-R1抗原结合.TR1-404抗体提高TRAIL诱导的Hela细胞凋亡作用.本研究为TRAIL-R1靶向的抗肿瘤治疗研究提供新方法.